動物造模 z-bio 2021-09-03 794

　　目的    構建免疫系統人源化的小鼠模型，并移植入人前列腺癌細胞系，以期用于前列腺癌免疫治療藥物研究。

　　方法    利用Ficoll密度梯度離心法，從新鮮的人外周血中分離出單個核細胞（peripheral bod mononucear cell，PBMC），經尾靜脈注射 NPG小鼠，構建具有人免疫系統的小鼠模型。注射后第3、4、5、6周分別采用斷尾法采集小鼠外周血，并用流式細胞儀監測小鼠外周血中人CD45＋+CD3+T細胞的動態變化水平。在注射后第3周給予小鼠皮下移植1×10'個前列腺癌2R1細胞，每周兩次監測腫瘤生長情況。當腫瘤生長至1000 mm2左右，對小鼠施行安樂死;利用流式細胞術、免疫組化、HE染色等方法分析人源化小鼠外周血、脾及腫瘤組織中人免疫細胞的浸潤情況。

　　結果    模型小鼠在移植人PBMC后3~6周期間，外周血中檢測到較高水平的CD45＋CD3+T細胞。第6周時處死小鼠，HE染色和免疫組化染色結果表明，模型小鼠的脾和腫瘤組織中具有人CD4+、CD8+T細胞的浸潤。

　　結論    成功構建了前列腺癌免疫人源化小鼠模型，其外周血、脾及前列腺癌腫瘤組織中均有高水平的人源性T細胞浸潤，為下一步構建良好的前列腺癌免疫治療臨床前模型奠定了基礎。